|
" اعتبار سنجي و ارزيابي کيفي کيت هاي تشخيصي تهيه شده تايپ O تب برفکي "
ابراهيمي، سعيده
| شماره شناسایی
|
:
|
18886210
|
| شماره مدرک
|
:
|
۶۸۱۷۷
|
| نام عام مواد
|
:
|
[گزارش نهایی -تجاری]
|
| شناسه افزوده
|
:
|
ابراهيمي، سعيده
|
|
|
:
|
قائم مقامي، شمس الدين
|
|
|
:
|
حميدي، عادل
|
|
|
:
|
رنجبر، محمدمهدي
|
|
|
:
|
مدني، رسول
|
|
|
:
|
احمدي، مهدي
|
| عنوان اصلي
|
:
|
اعتبار سنجي و ارزيابي کيفي کيت هاي تشخيصي تهيه شده تايپ O تب برفکي
|
| نام نخستين پديدآور
|
:
|
ابراهيمي، سعيده
|
| عنوان اصلي به زبان ديگر
|
:
|
Validation and quality assessment of prepared diagnostic kits for type O foot and mouth disease
|
| وضعیت انتشار
|
:
|
کرج: موسسه تحقيقات واکسن وسرم سازي رازي، ۱۴۰۴
|
| فروست
|
:
|
شماره ثبت ۶۸۱۷۷ مورخ ۱۴۰۴/۰۷/۲۹۶۸۱۷۷
|
|
|
:
|
شماره طرح : 12-98-18-002-02001-020052
|
|
|
:
|
سامانه سمپات
|
| توصیفگر
|
:
|
بیماری تب برفکی
|
|
|
:
|
الایزا،
|
|
|
:
|
کیت تشخیصی،
|
|
|
:
|
گوساله
|
| خلاصه یا چکیده
|
:
|
تب برفکی یکی از زیانبارترین بیماری های دامی است که می تواند خسارت های جبران ناپذیری را به صنعت دام کشور وارد نماید. واکسیناسیون با واکسنهای غیرفعال هنوز راه اصلی کنترل بیماری تب برفکی (FMD) در کشورهایی مانند ایران است که این بیماری بومی است. سطح آنتیبادی خنثیکننده در حیوانات واکسینه شده مستقیماً با میزان محافظت از آنها در برابر ویروس مرتبط است. در حال حاضر، آنتیبادی خنثیکننده عمدتاً با استفاده از آزمایش خنثیسازی ویروس (SNT) بر اساس کشت سلولی شناسایی میشود که پرزحمت و زمانبر است و به امکانات زیادی نیاز دارد. روش اصلی دیگر برای ارزیابی ایمنی و محاسبه تیتر آنتی بادی روش الایزا است. در این مطالعه چند روش برای طراحی و ساخت کیت الایزای غیر مستقیم استفاده شد که شامل 1- استفاده از ویروس کامل سروتیپ O تب برفکی به عنوان آنتی ژن در ساخت الایزای غیر مستقیم، 2- استفاده از روش های بیوانفورماتیکی و طراحی و سنتز دوپپتید بر اساس ژن های vp1 و vp2 سروتیپ O تب برفکی می باشد و در نهایت کیت های الایزا جهت تعیین تایپ O ویروس تب برفکی برمبنای پپتید های سنتتیک اختصاصی تایپ O و آنتی بادی های Poly specific ساخته شدند. سپس ارزیابی های لازم جهت اعتبارسنجی و ارزیابی کیفی کیت ها انجام شد. بدین منظور از آزمایش خنثیسازی ویروس (SNT) به عنوان یک تست استاندارد طلایی برای تعیین سطح آنتی بادی سرم و مقایسه نتایج آن با روش ELISA غیرمستقیم برای تعیین حساسیت و ویژگی کیت های ساخته شده استفاده شد. همچنین پارامترهای دیگری چون پایداری تسهیل شده و دقت بین سنجش و درون سنجش و مقایسه نتایج با کیت تجاری نیز بررسی گردید. براساس نتایج بدست آمده حساسیت و ویژگی کیت های طراحی شده در این تحقیق به ترتیب 96.66% و 100% می باشد. همچنین در تست دقت میزان خطای درون سنجش و بین سنجش به ترتیب 8.01% و 9.03% می باشد که با توجه به استانداردهای موجود قابل قبول بوده و در مقایسه با کیت تجاری نیز نتایج بدست آمده همخوانی بالایی را نشان دادند. بنابراین این کیت ها اختصاصییت، حساسیت، دقت و پایداری مناسبی را نشان دادند و قابلیت انجام مطالعات بیشتر جهت تجاری سازی را دارند.
|
|
|
:
|
Foot-and-mouth disease (FMD) is one of the most detrimental diseases affecting livestock, capable of inflicting irreparable damage on a country's livestock industry. In countries like Iran, where the disease is endemic, vaccination with inactivated vaccines remains the primary method for controlling FMD. The level of neutralizing antibodies in vaccinated animals is directly correlated with their protection against the virus. Currently, neutralizing antibodies are primarily detected using the cell culture-based virus neutralization test (SNT), which is labor-intensive, time-consuming, and requires extensive facilities. Another main method for safety evaluation and antibody titer calculation is the ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) technique. In this study, several approaches were employed to design and manufacture an indirect ELISA kit. These approaches included: 1) utilizing the complete foot-and-mouth disease serotype O virus as an antigen in the indirect ELISA; 2) applying bioinformatics methods to design and synthesize dipeptides based on the VP1 and VP2 genes of foot-and-mouth disease serotype O; and finally ELISA kits were made to determine type O of foot and mouth virus based on type O specific synthetic peptides and poly specific antibodies. Then, the necessary evaluations were conducted to validate and assess the quality of the kits. For this purpose, the virus neutralization test (SNT) was employed as the gold standard to determine serum antibody levels and to compare its results with those obtained from the indirect ELISA method, thereby assessing the sensitivity and specificity of the kits. Additionally, other parameters such as facilitated stability, inter-assay accuracy, and intra-assay accuracy were investigated, with results compared to those from a commercial kit. Based on the findings, the sensitivity and specificity of the kits developed in this research were found to be 96.66% and 100%, respectively. Also, in the accuracy test, the intra-assay and inter-assay error rates were found to be 8.01% and 9.03%, respectively. These rates are considered acceptable according to existing standards. Furthermore, when compared to the commercial kit, the results demonstrated a high level of consistency. Therefore, these kits exhibit appropriate specificity, sensitivity, accuracy, and stability, making them suitable for further studies aimed at commercialization.
|
| |